Перейти к основному содержанию

Научно-практический рецензируемый ежемеcячный журнал. Орган Министерства здравоохранения Республики Беларусь
Входит в Перечень научных изданий Республики Беларусь для опубликования результатов диссертационных исследований по медицинским и биологическим наукам. Журнал включен в систему Российского научного цитирования.
Журнал издается с 1924 года.

Мутации резистентности вируса ВИЧ у пациентов с ВИЧ/СПИДом, находящихся на ВААРТ и не получавших АРП

It appears your Web browser is not configured to display PDF files. Download adobe Acrobat or click here to download the PDF file.

Click here to download the PDF file.

Цель исследования. Определить мутации резистентности ВИЧ у ВИЧ-инфицированных пациентов, находящихся на ВААРТ, и наивных, не получающих антиретровирусные препараты.

Материал и методы. Представлены данные по определению мутаций резистентности у 173 пациентов с ВИЧ/ СПИДом, 77 из которых находились на ВААРТ, 96 не получали антиретровирусные препараты. Для выявления резистентных штаммов ВИЧ использовали методы РТ-ПЦР, секвенирование, программы Sequencing Analysis Software v. S.1.1, BioEdit, SeqScape v. 2.6, MEGA 4.1.

Результаты. Из 59 пациентов (взрослые) у 38 (64,4%) (24 мужчины и 14 женщин) выявлена мутация в положении M184V/I, которая является причиной появления высокого уровня резистентности ВИЧ к нуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы (НИОТ). В 27 (45,8%) случаях (13 женщин и 14 мужчин) определялась мутация K103N, ведущая к высокому уровню устойчивости ВИЧ к ненуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы (ННИОТ). В 20 (33,9%) случаях (16 мужчин и 4 женщины) обнаружили мутацию G190G/S/А, с которой связано появление мутаций высокого уровня резистентности к ННИОТ. В 15 (25,4%) случаях (3 женщины и 12 мужчин) определена комбинация мутаций M184V+G1905. У 11 (18,6%) пациентов (6женщин и S мужчин) с ВИЧ-инфекцией обнаружена комбинация мутаций резитентности K103N+M184V. Из 18 детей у 15 (83,3%) (9 девочек и 6 мальчиков) определена мутация в положении M184V, ведущая к высокому уровню резистентности к НИОТ. В 10 (55,6%) и 2 (11,1%) случаях выявлялись мутации в положении G1905 и K1035 соответственно. У 2 детей определена мутация Y188L, которая ведет к появлению устойчивости ВИЧ высокого уровня к ННИОТ. Определено, что распространенность первичных мутаций резистентности вируса к антиретровирусным препаратам в стране является низкой (<5%) для всех их классов.

Одной из основных причин, влияющих на эффективность высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ), является большая степень изменчивости определенных участков генома вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), ведущая к появлению мутаций, ассоциированных с резистентностью к препаратам антиретровирусной терапии (АРТ). В схемах АРТ применяется более 30 препаратов S классов, известны мутации в геноме вируса, ведущие к его устойчивости к этим препаратам [1—3]. Вместе с тем в настоящее время альтернативы ВААРТ не существует, применяющиеся схемы лечения позволяют значительно повысить жизненный статус данной категории пациентов.

Своевременное определение мутаций резистентности и, соответственно, смена схемы лечения лежат в основе эффективности ВААРТ.

В Республике Беларусь наблюдается стабильно высокий рост количества случаев ВИЧ/СПИДа.

На протяжении последних 5 лет в стране выявляется более 1000 новых случаев ежегодно. На 01.05.2014 в стране официально зарегистрировано 16 315 случаев ВИЧ/СПИДа, тогда как на 01.05.2013 было выявлено 14 663 ВИЧ-инфицированных. Таким образом, за год в стране выявлено 1652 новых случая инфицирования. Наибольшее количество случаев ВИЧ/СПИДа определялось в возрастной группе 15—29 лет (9005), в настоящее время большинство новых случаев ВИЧ- инфекции регистрируется в возрастной группе 30— 45 лет, основным механизмом передачи вируса становится сексуальный.

Так, если в 2012 г. на его долю приходилось 77,2% от всех новых случаев, то в 2014 г. более 83% пациентов инфицировались при половых контактах.

В настоящее время ВААРТ получают более 5000 пациентов, в 2008 г. — 1200, в 2004 г. — только 15 человек. Прогнозируется, что к 2015 г. АРТ будут получать 7000 пациентов.

Цель исследования — определить мутации резистентности ВИЧ у пациентов с ВИЧ/СПИДом, находящихся на ВААРТ, и у пациентов, не получающих АРТ.

Материал и методы

Мутации резистентности высокого уровня определяли у 77 пациентов (59 взрослых и 18 детей) с ВИЧ/ СПИДом, находящихся на ВААРТ, за период 2008— 2013 гг. Плазма крови от 96 пациентов с первично выявленным ВИЧ/СПИДом, не получающих АРТ, была исследована на наличие первичных мутаций резистентности. Для определения мутаций использовали коммерческую тест-систему «ViroSeq™ HIV-1, HIV-1 genotyping system v. 2.0» («Abbott», США) с аналитической чувствительностью 2-103 копий РНК/мл. Набор позволяет секвенировать участок гена pol ДНК ВИЧ-1, кодирующего синтез протеазы и 2/3 обратной транскриптазы (1800 п. н.). Электрофорез фрагментов ДНК после секвенирующей ПЦР проводили на генетическом анализаторе «ABI PRISM 3100-Avant» («Applied Biosystems», США).

Анализ полученных фрагментов и определение мутаций резистентности ВИЧ к препаратам АРТ осуществляли с использованием коммерческой базы данных «ViroSeq HIV-1 genotyping system software v. 2.6 analysis» («Abbott», США) и Stanford University «HIV Drug Resistance Database», а также сприменением программных продуктов «Sequencing Analysis Software v. S.1.1», «BioEdit», «SeqScape v. 2.6».

Для филогенетического анализа полученных фрагментов использовали программу «Mega 4.1» (деревья с корнем построены методом присоединения соседей).

ЛИТЕРАТУРА
1. Boyer P. L., Sarafianos S. G., Arnold Е., Hughes S. H. // J. Virol.— 2002.— Vol. 76.— P. 9143—9251.
P. Casado J. l., Moreno A., Hertogs K., et al. // AIDS Res. Hum. Retrovir.— 2002.— Vol. 18.— P. 771—775.
3.    Kellam P., Larder B. A. // J. Virol.— 1995.— Vol. 69.— P. 669— 674.
4.    Krusi A., Milloy M. J., Kerr Т., et al. //Antivir. Ther.— 2010.— Vol. IS, № S.— P. 789—796.
5.    Laisaar K. Т., Uuskula A., Sharma A., et al. // AIDS Care.— 2013.— Vol. 25, № 7.— P. 863—873.
6.    Lukashov V. V., Karamov Е. V., Eremin V. F., et al. // AIDS Res. Hum. Retrovir.— 1998.— Vol. 14.— P. 1299—1303.

Поступила 08.07.14.

Адрес для корреспонденции:
Ерёмин Владимир Федорович.
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии.
220114, Минск, ул. Филимонова 23; сл. тел. (8-017) 268-04-16.

  • Я только что вернулся с большого международного форума врачей и ученых, проходившего в Санкт-Петербурге. На нем обсуждались вопросы совершенствования диагностики и лечения хронического миелолейкоза. Мы теперь уже добились того, что продолжительность жизни таких больных увеличилась в четыре раза, в России уже живут, радуются жизни и трудятся люди, излеченные от этого тяжелого заболевания... На форуме наряду с отечественными клиницистами выступали гематологи из Хьюстона (США), Турина (Италия), Мангейма (Германия).
  • Я вспоминаю свои беседы с больными — преподавателями медицинского института, профессорами. Что говорить, трудно с ними работать! Трудно с ними говорить и действовать, как со всеми остальными пациентами...Что еще характерно для заболевшего врача в психологическом плане? Частенько такой пациент напрочь забывает не только действие препаратов, но и время их приема, хотя сам в своей жизни неоднократно назначал их.
  • При осмотре мы прежде всего также уделяем особое внимание кожному покрову. Нормальная кожа и изменения ее при различных заболеваниях довольно подробно представлены в учебниках и монографиях. Здесь мне хочется лишь привести некоторые сведения, которые будут интересны врачам различных специальностей и позволят понять, почему кожа претерпевает изменения. Известно, что кожа — это полноценный орган, который дополняет и дублирует функции различных внутренних органов. Она активно участвует в процессе дыхания, выделения, обмене веществ.
  • Я никогда не заканчиваю расспроса-беседы с больным без того, чтобы выяснить хотя бы ориентировочно состояние взаимоотношений в семье. Полипрагмазия — бич современной медицины, клиники внутренних болезней. На обходах часто приходится видеть, как больным назначают 13—16 препаратов, нередко с взаимоисключающими фармакологическими свойствами.
  • Изучив сотни диагностических ошибок, сотрудники нашего коллектива убедились, что в ходе диагностического процесса практические врачи нарушают даже самые элементарные правила логики. Например, они неправильно применяют методы аналогии, индукции, дедукции.
  • А в настоящее время мне самому приходилось и в поликлиниках, и в стационарах слышать такие «уважительные и милые» обращения медицинских работников (и даже студентов, которые берут со старших пример!!!), как «голубушка», «бабуля», «золотце», «милочка», «голубчик», «бабуся», «дедуся», «дедуля», «женщина», «человек», «старик», «папаша», «мамаша», «отец», «мать», «барышня», «мужик», «тетя», «дядя» и т. д. Многие из таких слов для больных обидны, полны презрения, как правило, задевают самолюбие пациентов и их родственников.
  • Он редко выслушивал до конца доклад о больном, часто сразу же задавал вопросы, уточняющие характер течения болезни, особенности жизни. Удивительно, что вслух он мог сказать: «Что-то тут мне не ясно. Чего-то не хватает в истории болезни». И начинал сам собирать и выяснять эти «недостающие звенья».
© Редакция журнала «Здравоохранение» - 1924 - 2014гг.
Разработка сайта - doktora.by - сайт для врачей Беларуси