ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА РЕКОМБИНАНТНЫХ ПОЛИПЕПТИДОВ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩИХ АНТИГЕНЗНАЧИМЫЕ УЧАСТКИ НУКЛЕОКАПСИДНЫХ БЕЛКОВ ХАНТАВИРУСОВ

Цель исследования. Получение высокоочищенных рекомбинантных полипептидов, представляющих антигенно-активные участки нуклеокапсидных белков хантавирусов Пуумала, Куркино, Хантаан и оценка их антигенной специфичности.

Материал и методы. В качестве исходного материала использованы вирусы Пуумала (штамм СG-1820), Хантаан (штамм 4950), Куркино (штамм Аа 118) и образцы сывороток крови больных гелефрагической лихорадкой с почечным синдромом, инфицированных этими вирусами. Для экспрессии рекомбинантных полипептидов использовали бактериальный штамм Escherichia coli BL21 (DE3). Применены стандартные генно-инженерные, молекулярно-биологические и иммунобиологические методы исследования.

Результаты. С использованием генно-инженерных методов исследования получены гибридные векторные конструкции pJC40/N PUU, pJC40/N DOB, pJC40/N HANT, обеспечивающие экспрессию рекомбинантных полипептидов вирусов Пуумала, Куркино и Хантаан в прокариотической системе E. coli, штамм BL21 (DE3). Методом иммунного блоттинга с использованием референс-сывороток, содержащих специфические антитела к вирусам Пуумала, Куркино, Хантаан, показана антигенная специфичность полученных рекомбинантных полипептидов.

Заключение. Сконструированы плазмиды pJC40/N PUU, pJC40/N DOB, pJC40/N HANT, в прокариотической системе E. coli экспрессированы рекомбинантные полипептиды, представляющие антигензначимые участки нуклеокапсидных белков вирусов Пуумала, Куркино, Хантаан, получены рекомбинантные полипептиды, не содержащие примесей бактериальных белков, показана их антигенная специфичность.

Контактная информация:

Семижон Павел Анатольевич — к. б. н., зав. лабораторией биотехнологии и иммунодиагностики особо опасных инфекций.

Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии.

220114, г. Минск, ул. Филимонова, 23; сл. тел. +375 17 268-04-19.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования: А. С. В., Е. П. С., Е. Г. Ф.,
П. А. С., А. А. И.

Сбор и обработка материала: Е. П. С., Е. Г. Ф., П. А. С., Е. Е. Г., Т. В. Ш., Т. К. Д.

Статистическая обработка данных: Е. П. С.

Написание текста: Е. П. С., Е. Г. Ф., Т. К. Д.

Редактирование: П. А. С., Е. А. Т., Т. В. Ш.

Конфликт интересов отсутствует.


Автор(ы): Е. П. СЧЕСЛЕНОК, Е. Г. ФОМИНА, П. А. СЕМИЖОН, Е. Е. ГРИГОРЬЕВА, Т. В. ШКОЛИНА, А. С. ВЛАДЫКО, Т. К. ДЗАГУРОВА, А. А. ИШМУХАМЕТОВ, Е. А. ТКАЧЕНКО
Медучреждение: РНПЦ эпидемиологии и микробиологии, Минск, Беларусь, Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М. П. Чумакова РАН, Москва, Российская Федерация